TGuide S96 Blutt/Zell/Tissue RNA Kit

A-1 Zell Lyse oder Homogeniséierung net genuch

---- Reduzéiert Probeverbrauch, erhéicht de Betrag u Lysisbuffer, erhéicht Homogeniséierung a Lysiszäit.

A-2 Probe Betrag ass ze grouss

---- Reduzéiert d'Quantitéit u benotzt Probe oder erhéicht d'Quantitéit u Lysisbuffer.

A-1 Net genuch Zell Lyse oder Homogeniséierung

---- Reduzéiert Probeverbrauch, erhéicht de Betrag u Lysisbuffer, erhéicht Homogeniséierung a Lysiszäit.

A-2 Probe Betrag ass ze grouss

---- W.e.g. kuckt op déi maximal Veraarbechtungskapazitéit.

A-3 RNA gëtt net komplett aus der Kolonn ausgeschloen

---- Nodeems Dir RNase-Fräi Waasser bäigefüügt hutt, loosst et fir e puer Minutten virum Zentrifugéieren.

A-4 Ethanol am Eluent

---- Nom Spülen, erëm zentrifugéieren an de Wäschbuffer sou vill wéi méiglech ewechhuelen.

A-5 Zellkulturmedium gëtt net komplett ewechgeholl

---- Wann Dir Zellen sammelt, gitt sécher datt d'Kulturmedium sou vill wéi méiglech ewechhuelt.

A-6 D'Zellen, déi an der RNAstore gelagert sinn, ginn net effektiv centrifugéiert

---- RNAstore Dicht ass méi grouss wéi den duerchschnëttleche Zellkulturmedium; also soll d'Zentrifugalkraaft erhéicht ginn. Et gëtt ugeholl fir bei 3000x g ze centrifugéieren.

A-7 Niddereg RNA Inhalt an Iwwerfloss an der Probe

---- Benotzt e positiven Probe fir ze bestëmmen ob den nidderegen Ausbezuele vum Probe verursaacht gëtt.

A-1 D'Material ass net frësch

---- Frësch Tissue solle direkt a flëssege Stickstoff gelagert ginn oder direkt an de RNAstore Reagens gesat ginn fir den Extraktiounseffekt ze garantéieren.

A-2 Probe Betrag ass ze grouss

---- Reduzéiert Probe Betrag.

A-3 RNase Kontaminatiounn

---- Och wann de Puffer am Kit net RNase enthält, ass et einfach RNase wärend dem Extraktiounsprozess ze kontaminéieren a sollt suergfälteg behandelt ginn.

A-4 Elektrophorese Verschmotzung

---- Ersetzt den Elektrophorese Puffer a gitt sécher datt d'Verbrauchsmaterial an de Loading Buffer fräi vu RNase Kontaminatioun sinn.

A-5 Ze vill Luede fir Elektrophorese

---- Reduzéiert d'Quantitéit vum Probe Luede, d'Laascht vun all Brunn däerf net méi wéi 2 μg sinn.

A-1 Probe Betrag ass ze grouss

---- Reduzéiert Probe Betrag.

A-2 E puer Proben hunn en héijen DNA Inhalt a kënne mat DNase behandelt ginn.

---- Féiert RNase-Free DNase Behandlung un déi kritt RNA Léisung, an d'RNA kann direkt fir spéider Experimenter no der Behandlung benotzt ginn, oder ka weider mat RNA Purification Kits gereinegt ginn.

Fir Glasware, gebak bei 150 ° C fir 4 Stonnen. Fir Plastikscontainer, an 0,5 M NaOH fir 10 min gedéift, duerno grëndlech mat RNase-gratis Waasser gespullt an dann steriliséiert fir de RNase komplett ze läschen. D'Reagenz oder Léisungen, déi am Experiment benotzt goufen, besonnesch Waasser, musse fräi vu RNase sinn. Benotzt RNase-gratis Waasser fir all Reagenspräparatiounen (füügt Waasser an eng propper Glasfläsch, füügt DEPC zu enger final Konzentratioun vun 0.1% (V/V), rëselt iwwer Nuecht an Autoklav).